Differenza tra nitrocellulosa e membrana di nylon
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Il differenza principale tra nitrocellulosa e membrana di nylon è che il la membrana di nitrocellulosa ha un'alta affinità per il legame con le proteine mentre la membrana di nylon ha un'alta affinità per il legame con l'acido nucleico. Inoltre, le interazioni idrofobiche ed elettrostatiche legano le macromolecole alle membrane di nitrocellulosa mentre le interazioni ioniche, idrofobiche ed elettrostatiche legano le macromolecole alle membrane di nylon
La nitrocellulosa e la membrana di nylon sono due tipi di membrane a cui le macromolecole sono trasferite dal gel. Tuttavia, le membrane di nitrocellulosa possono essere utilizzate anche per legare DNA e RNA.
Aree chiave coperte
1. Cos'è una membrana di nitrocellulosa
- Definizione, struttura, meccanismo di legatura, vantaggi
2. Cos'è una membrana di nylon
- Definizione, struttura, meccanismo di legatura, vantaggi
3. Quali sono le somiglianze tra la nitrocellulosa e la membrana di nylon
- Profilo delle caratteristiche comuni
4. Qual è la differenza tra la nitrocellulosa e la membrana di nylon
- Confronto tra le principali differenze
Parole chiave
Affinità, Biodyne A, Biodyne B, nitrocellulosa, acidi nucleici, nylon, dimensione dei pori, proteine
Cos'è una membrana di nitrocellulosa
La membrana nitrocellulosa è una matrice comune utilizzata nel western blotting a causa dell'elevata affinità delle proteine. Tuttavia, può essere utilizzato per rilevare gli acidi nucleici oltre alle proteine immobilizzate e alle glicoproteine. L'immobilizzazione delle macromolecole avviene principalmente attraverso interazioni idrofobiche. I legami idrogeno si formano anche tra i gruppi nitro della membrana e le catene laterali dell'amminoacido delle proteine. L'immobilizzazione proteica sarà alta nel sale alto e basse concentrazioni di metanolo.
Figura 1: principio della macchia
Le membrane di nitrocellulosa sono disponibili in 100% pura forma di nitrocellulosa con una superficie elevata, che è uniforme. Le pre-dimensioni disponibili sono 0,2 μm e 0,45 μm. La piccola dimensione dei pori è migliore per il legame con piccole proteine (<14 kDa). The binding and retaining capacity of proteins is 80-250 μg/cm2. Le membrane preassemblate sono pronte per l'uso. Uno dei principali vantaggi delle membrane di nitrocellulosa è il suo fondo molto basso in quanto può essere facilmente bloccato. Le membrane di nitrocellulosa supportate possono essere rimosse e riprovate.
Cos'è una membrana di nylon
La membrana di nylon è una matrice ampiamente utilizzata per il legame degli acidi nucleici. Le membrane di nylon sono meccanicamente più resistenti delle membrane di nitrocellulosa. I due principali tipi di membrane di nylon utilizzati nel blotting sono Biodyne A e Biodyne B. Le dimensioni dei pori di entrambi i tipi sono 0,45 μm. Sono resistenti al calore e ai solventi. Inoltre, non si restringono, si spezzano o si strappano. Entrambi danno uno sfondo basso rispetto alle membrane di nitrocellulosa.
Figura 2: Southern Blot Membrane
- Biodyne A è costituito da nylon 66 non modificato. Alta sensibilità e risoluzione eccellente sono i vantaggi di Biodyne A. Poiché il Biodyne A contiene sia cariche positive che negative, può essere utilizzato per legare molti tipi di macromolecole.
- Biodyne B è costituito da nylon 66 caricato positivamente. Pertanto, ha un'eccellente capacità legante per acidi nucleici carichi negativamente come DNA e RNA.
Somiglianze tra nitrocellulosa e membrana di nylon
- Le membrane di nitrocellulosa e nylon sono due tipi di membrane utilizzate per trasferire macromolecole dal gel nelle tecniche di blotting.
- Permettono il rilevamento di macromolecole sulla membrana.
- Entrambi i tipi di membrane possono essere utilizzati per trasferire acidi nucleici.
- Possono essere spogliati e ripresi.
Differenza tra nitrocellulosa e membrana di nylon
Definizione
La membrana nitrocellulosa si riferisce a una membrana adesiva utilizzata per immobilizzare gli acidi nucleici e le proteine in tamponamento mentre la membrana di nylon si riferisce a un tipo di membrana ad alta resistenza e resistenza al calore usata per immobilizzare le macromolecole.
Fatto di
Le membrane di nitrocellulosa sono costituite da cellulosa nitrata mentre le membrane di nylon sono costituite da Biodyne A e Biodyne B di nylon non modificati o caricati positivamente.
Dimensione dei pori
Le dimensioni dei pori delle membrane di nitrocellulosa sono 0,2 μm e 0,45 μm mentre le dimensioni dei pori delle membrane di nylon sono 0,45 μm.
Forza
Le membrane di nitrocellulosa sono fragili e quindi non riutilizzabili mentre le membrane di nylon sono meccanicamente forti.
Metodo di trasferimento
Il trasferimento elettroforetico è utilizzato principalmente nel trasferimento di proteine sulle membrane di nitrocellulosa mentre il trasferimento capillare è una pratica comune con le membrane di nylon.
Affinità
Le membrane di nitrocellulosa hanno un'alta affinità per le proteine, mentre le membrane di nylon hanno un'alta affinità per gli acidi nucleici. Le membrane di nitrocellulosa possono anche essere usate per gli acidi nucleici.
assorbente
Le membrane di nitrocellulosa sono migliori per il Western blotting, mentre le membrane di nylon sono migliori per il Southern e Northern Blotting.
Interazioni vincolanti
Le interazioni idrofobiche ed elettrostatiche legano le macromolecole alle membrane di nitrocellulosa mentre le interazioni ioniche, idrofobiche ed elettrostatiche legano le macromolecole alle membrane di nylon.
Capacità di legame proteico
La capacità di legare le proteine della membrana di nitrocellulosa è 80-250 μg / cm2 mentre la capacità di legare le proteine della membrana di nylon è di 150-200 μg / cm2.
Conclusione
La membrana nitrocellulosa è una membrana fragile utilizzata principalmente per immobilizzare le proteine in Western blot mentre la membrana di nylon è una membrana resistente principalmente utilizzata per immobilizzare gli acidi nucleici. Le membrane di nitrocellulosa legano le molecole attraverso le interazioni idrofobiche mentre le membrane di nylon legano le molecole attraverso le interazioni elettrostatiche. Pertanto, la principale differenza tra nitrocellulosa e membrana di nylon è l'affinità.
Riferimento:
1. "Membrane di nitrocellulosa per Western Blotting | Thermo Fisher Scientific - LK. "Disponibile Thermo Fisher Scientific, Thermo Fisher Scientific
2. "Membrana in Biodyne A Nylon, 0,45 m, 8 Cm x 12 Cm". Thermo Fisher Scientific, Thermo Fisher Scientific, disponibile qui
3. "Membrana in nylon Biodyne B, 0,45 m, 8 Cm x 12 Cm." Thermo Fisher Scientific, Thermo Fisher Scientific, disponibile qui
Cortesia dell'immagine:
1. "Blot biology" di Gbdivers - Opera propria (CC BY-SA 3.0) via Commons Wikimedia
2. "Southern blot membrane" di Bojan Žunar - Opera propria (CC BY-SA 4.0) via Commons Wikimedia
