Differenza tra immunocitochimica e immunoistochimica

Differenza chiave - Immunocitochimica vs Immunoistochimica
 

Immunocitochimica (ICC) e Immunohistochemistry (IHC) sono due tecniche ampiamente utilizzate nella diagnostica molecolare, che identificano e confermano l'insorgere sia di malattie non trasmissibili che di malattie trasmissibili basate sui marcatori molecolari presenti sulle cellule. La differenza chiave immunocitochimica e immunoistochimica è la molecola che viene utilizzata come procedura di analisi in queste tecniche. In ICC, vengono utilizzati anticorpi primari e secondari coniugati con marcatori come fluorescenza mentre gli anticorpi IHC, monoclonali e policlonali sono utilizzati per le determinazioni diagnostiche.

CONTENUTO

1. Panoramica e differenza chiave
2. Cos'è Immunocitochimica
3. Cos'è Immunohistochemistry
4. Somiglianze tra immunocitochimica e immunoistochimica
5. Confronto affiancato - Immunocitochimica vs Immunoistochimica in forma tabulare
6. Sommario

Cos'è Immunocytochemistry (ICC)?

ICC utilizza anticorpi primari e secondari legati a marcatori come marcatori o enzimi fluorescenti ed è un potente metodo di rilevamento per rilevare antigeni presenti su cellule bersaglio che possono essere particelle cellulari infettive o cellule tumorali cancerose. Per l'immunocitochimica sono richiesti tre tipi di controlli.

• Anticorpo primario: controllo che mostra la specificità dell'anticorpo primario che si lega all'antigene
• Anticorpo secondario: controllo che mostra che l'etichetta è specifica per l'anticorpo primario
• Controlli dell'etichetta - mostra che l'etichettatura è il risultato dell'etichetta aggiunta e non il risultato dell'etichettatura endogena.

Figura 01: Immunocitochimica identifica le singole proteine ​​all'interno delle cellule (qui la tirosina idrossilasi negli assoni dei neuroni autonomici simpatici è mostrata in verde).

Il controllo dell'anticorpo primario è specifico per ogni nuovo anticorpo e non può essere ripetuto per ciascun esperimento. Il controllo dell'anticorpo secondario è progettato in base all'anticorpo primario utilizzato nell'esperimento ed è incluso in ciascun esperimento. Il controllo dell'etichettatura è incluso se una condizione della procedura viene modificata, il campione viene modificato o quando viene trovata un'etichetta inaspettata.

Le due applicazioni principali di ICC sono Radio Immuno-Assay (RIA) e Enzyme Linked Immunosorbent Assay (ELISA). L'anticorpo più comune utilizzato è l'immunoglobulina G.

Cos'è Immunohistochemistry (IHC)?

In Immunoistochimica, il campione sorgente contiene anticorpi monoclonali e policlonali allo scopo di determinare la presenza di antigeni in cellule estranee. Questa tecnica è basata sulla reazione specifica del legame dell'antigene-anticorpo. Gli anticorpi utilizzati nel rilevamento possono essere etichettati con diversi marcatori; possono essere marcatori di fluorescenza, marcatori radiomarcati o marcatori chimici. Attraverso facilitazione in vitro legandosi tra l'antigene e l'anticorpo mirato, può essere determinata la presenza o l'assenza di una particolare proteina di una cellula.

Figura 02: colorazione immunoistochimica del rene normale con CD10

Attualmente, gli scienziati sono coinvolti nello sviluppo di anticorpi bersaglio per antigeni specifici presenti in cellule che possono svilupparsi come cellule tumorali maligne o antigeni presenti in agenti infettivi come l'HIV.

Quali sono le somiglianze tra Immunocitochimica e Immunoistochimica?

• Le reazioni sono altamente specifiche e accurate in ICC e IHC.
• Le applicazioni di ICC e IHC comprendono la diagnostica del cancro e delle malattie infettive.
• Le condizioni sterili dovrebbero essere mantenute in entrambe le condizioni e dovrebbero essere eseguite in in vitro
• Entrambe le tecniche forniscono risultati riproducibili.
• Entrambi sono rapidi.
• Etichettatura radio, tecniche di fluorescenza vengono utilizzate come metodi di rilevamento sia in ICC che in IHC.
• Entrambi sono basati sull'associazione antigene-anticorpo.

Qual è la differenza tra Immunocitochimica e Immunoistochimica?

Immunocitochimica (ICC) vs Immunohistochemistry (IHC)
ICC utilizza marcatori di anticorpi primari e secondari quali marcatori o enzimi fluorescenti ed è un potente metodo di rilevamento per rilevare gli antigeni presenti sulle cellule bersaglio.	L'IHC è un metodo che utilizza anticorpi monoclonali e policlonali per determinare la presenza di antigeni che sono speciali marcatori proteici posti sulle superfici cellulari.
Fonte di esempio
I campioni derivati ​​da tessuti che sono stati trattati istologicamente in sezioni sottili sono utilizzati in ICC.	IHC utilizza campioni costituiti da cellule cresciute in un monostrato o cellule in sospensione che vengono depositate su un vetrino.
Esempio di elaborazione
In ICC, le cellule dovrebbero essere permeabili per facilitare la penetrazione degli anticorpi verso i bersagli intracellulari.	In IHC, le cellule sono fissate in formalina, incluse in paraffina prima della colorazione.

Sommario - Immunocitochimica vs Immunoistochimica

La diagnostica molecolare viene utilizzata per identificare e confermare l'insorgenza di malattie non trasmissibili e malattie trasmissibili basate sui marcatori molecolari presenti sulle cellule. I marcatori molecolari possono essere proteine ​​o sequenze di DNA o RNA; lo sviluppo di tecnologie come ICC e IHC hanno spianato la strada agli scienziati per identificare la malattia e la sua causa in una fase iniziale. Sia l'ICC che l'IHC dipendono dalle reazioni specifiche tra l'anticorpo e l'antigene, sebbene la fonte del campione. La principale differenza tra immunocitochimica e immunoistochimica è l'elaborazione di campioni delle due procedure.

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Riferimenti:

1. Burry, Richard W. "Controlli per Immunocitochimica: un aggiornamento." Journal of Histochemistry and Cytochemistry, SAGE Publications, Jan. 2011, Disponibile qui. Accesso 24 agosto 2017.
2. Duraiyan, Jeyapradha, et al. "Applicazioni di immunoistochimica". Journal of Pharmacy & Bioallied Sciences, Medknow Publications & Media Pvt Ltd, agosto 2012, Disponibile qui. Accesso 24 agosto 2017.

Cortesia dell'immagine:

1. "Immunohistochemistry" di Swharden - Opera propria (CC BY-SA 3.0) attraverso Commons Wikimedia
2. "Kidney cd10 ihc" di Nephron - Opera propria (CC BY-SA 3.0) attraverso Commons Wikimedia