Differenza tra HPLC e HPTLC

Differenza chiave: HPLC vs HPTLC
 

La differenza chiave tra HPLC e HPTLC è quella HPLC consente la separazione quantitativa dei componenti in un campione mentre HPTLC non consente la separazione quantitativa dei componenti in un campione.

La cromatografia è un metodo di separazione fisica che viene utilizzato per separare e identificare i componenti in una miscela. Sia HPLC che HPTLC sono tecniche cromatografiche. HPLC è una cromatografia liquida ad alte prestazioni. HPTLC è una cromatografia su strato sottile ad alte prestazioni.

CONTENUTO

1. Panoramica e differenza chiave
2. Che cos'è HPLC
3. Che cos'è HPTLC
4. Confronto affiancato - HPLC vs HPTLC in forma tabulare
5. Sommario

Che cos'è HPLC?

HPLC è cromatografia liquida ad alta prestazione. È una tecnica analitica utilizzata per separare, identificare e quantificare i componenti in una miscela. In questa tecnica, il campione viene sciolto in un solvente adatto. Quindi il solvente con il campione viene fatto passare attraverso una pompa con una data pressione. La pompa è riempita con materiale adsorbente solido. Quindi alcuni componenti si legano fortemente al materiale assorbente mentre altri componenti si legano liberamente. Ciò fa sì che i componenti abbiano portate diverse attraverso la pompa. Pertanto, i componenti possono essere separati facilmente.

Figura 01: un sistema HPLC

Il materiale adsorbente che riempie la pompa è noto come fase stazionaria. Il solvente con il campione disciolto è noto come fase mobile. La pompa utilizzata in questa tecnica è chiamata la colonna. La colonna è riempita con un materiale adsorbente, più comunemente, particelle di silice. Le dimensioni di queste particelle possono variare da 2 a 50 μm. Il processo di separazione è influenzato dalla composizione della fase mobile e dalla temperatura del sistema. Le interazioni tra la fase stazionaria e il componente nel campione possono essere interazioni idrofobiche, interazioni dipolo-dipolo, legame ionico, ecc..

La pressione operativa dell'HPLC è notevolmente superiore a quella della cromatografia liquida tradizionale. Si trova a circa 50-350 bar. La differenza tra cromatografia liquida e HPLC è che nella cromatografia liquida, il campione cade attraverso la colonna sotto gravità mentre, in HPLC, il campione viene pressurizzato attraverso la colonna. La dimensione della colonna e le particelle assorbenti sono anche molto piccole rispetto alla cromatografia liquida tradizionale. Tuttavia, la risoluzione fornita dalla tecnica HPLC è superiore.

Che cos'è HPTLC?

HPTLC è cromatografia su strato sottile ad alte prestazioni. È la forma avanzata e automatizzata della tradizione TLC. Questa tecnica fornisce una risoluzione efficiente in un breve periodo di tempo. In questo metodo di analisi, il campione e un riferimento possono essere analizzati contemporaneamente, il che consente di confrontare il campione con il riferimento. Fornisce una precisione analitica migliorata rispetto ad altre tecniche cromatografiche. Il tempo impiegato per l'analisi è inferiore. La tecnica è una tecnica a basso costo.

Figura 02: analisi dei coloranti alimentari con HPTLC

Il metodo HPTLC è un processo semplice e viene eliminata anche la fase di preparazione del campione (nella TLC tradizionale, la fase di preparazione del campione è inclusa prima della separazione, che comprende la pulizia e l'arricchimento). Il solvente può essere utilizzato direttamente senza alcun pretrattamento sebbene altre tecniche cromatografiche richiedano pre-trattamenti come degasaggio, filtrazione, ecc..

Il materiale adsorbente utilizzato in HPTLC è silice con dimensioni particellari molto piccole. Nella TLC tradizionale, la dimensione delle particelle di silice è di 5-20 μm mentre, in HPTLC, è di 4-8 μm. Il campione viene applicato alla piastra HPTLC utilizzando un applicatore. Dà un'applicazione uniforme e sicura. Quindi le piastre vengono posizionate in una camera con la fase mobile. La camera dovrebbe essere saturata con il vapore della fase mobile. Dopo il processo HPTLC, è possibile rilevare gli spot che sono stati spostati. Nel rilevare i punti sulla piastra, la tecnica HPTLC utilizza una regione UV adatta o una camera di iodio.

Qual è la differenza tra HPLC e HPTLC?

HPLC vs HPTLC
HPLC è una cromatografia liquida ad alte prestazioni.	HPTLC è una cromatografia su strato sottile ad alte prestazioni.
Tecnica
Nell'HPLC, la fase mobile con il solvente viene fatta passare attraverso una colonna riempita con la fase stazionaria.	In HPTLC, il campione viene individuato su una piastra TLC e posizionato all'interno di una camera contenente la fase mobile; quindi il campione è autorizzato a migrare verso l'alto la piastra insieme alla fase mobile.
misurazione
In HPLC, le differenze tra le velocità di flusso dei componenti attraverso la colonna vengono utilizzate per separare i componenti nel campione.	In HPTLC, le differenze tra le distanze percorse da ciascun componente nel campione vengono utilizzate per separare i componenti nel campione.
Separazione quantitativa
HPLC consente la separazione quantitativa dei componenti in un campione.	HPTLC non consente la separazione quantitativa dei componenti in un campione.

Riepilogo: HPLC vs HPTLC

HPLC e HPTLC sono due tecniche cromatografiche. La differenza chiave tra HPLC e HPTLC è che HPLC consente la separazione quantitativa dei componenti in un campione mentre HPTLC non consente la separazione quantitativa dei componenti in un campione.

Riferimento:

1. "Cromatografia liquida ad alte prestazioni." Wikipedia, Wikimedia Foundation, 10 aprile 2018, Disponibile qui.
2. "HPTLC." LinkedIn SlideShare, 30 maggio 2011, Disponibile qui.

Cortesia dell'immagine:

1. "HPTLCplatetoMS" di Kjaergaard su Wikipedia in inglese - Trasferito da en.wikipedia a Commons (dominio pubblico) tramite Commons Wikimedia
2. "Hplc" di PD Dr. rer. nat. habil. Gertrud Morlock Professore associato (Privatdozentin) Università di Hohenheim Istituto di chimica alimentare - G. Morlock, C. Oellig, CAMAG Bibliography Service 103 (2009) via Commons Wikimedia