Vediamo prima il significato di HPLC e LCMS prima di analizzare la differenza tra HPLC e LCMS. La cromatografia è una tecnica di separazione nell'analisi chimica in cui i costituenti del campione vengono separati durante il passaggio attraverso un mezzo cromatografico. Coinvolge anche l'interazione con il campione, la fase stazionaria e la fase mobile. HPLC rappresenta Cromatografia liquida ad alta prestazione, ed è usato come metodo di cromatografia liquida in chimica analitica. La combinazione di Cromatografia liquida e spettroscopia di massa (LCMS) è stato sviluppato per l'analisi quantitativa di biomolecole selezionate ed è una procedura di analisi altamente sensibile, precisa e specifica rispetto all'HPLC. Questo è il differenza chiave tra HPLC e LCMC. Questo articolo ti introdurrà a HPLC e LCMC che trattano l'analisi chimica e discuteranno le differenze tra HPLC e LCMS.
La cromatografia liquida ad alta prestazione (HPLC) è molto popolare tecnica di separazione in chimica analitica. È principalmente utilizzato per separare i componenti, per identificare e quantificare ciascun componente in una miscela. In precedenza, questo metodo era noto come cromatografia liquida ad alta pressione perché dipendeva dalle pompe per far fluire un solvente liquido pressurizzato comprendente la miscela campione attraverso una colonna imballata con un materiale adsorbente solido. Ogni costituente nella miscela campione interagisce in modo diverso con il materiale adsorbente solido, che si traduce in diverse velocità di flusso per diversi costituenti. Questo può portare alla separazione dei componenti mentre fuoriescono dalla colonna HPLC.
HPLC è stato usato per vari applicazioni ad esempio analisi dei livelli di vitamina D nel sangue, uso illegale di droghe di atleti rilevando i residui di droga nelle loro urine, ordinare i costituenti di un campione biologico complesso per scopi di ricerca e analisi e produzione di prodotti farmaceutici.
La cromatografia liquida-spettrometria di massa (LCMS) è una tecnica analitica che combina le capacità di separazione fisica della cromatografia liquida con le capacità di analisi di massa della spettrometria di massa (MS). La cromatografia liquida è una tecnica di separazione e la spettrometria di massa viene utilizzata per analizzare il rapporto massa / carica delle particelle cariche. La separazione fisica viene solitamente ottenuta mediante HPLC e, in alternativa, LCMS noto anche come HPLC-MS. LCMS è un tecnica analitica dominante questo ha un altissima precisione, sensibilità e specificità rispetto a HPLC. Pertanto, è utile in molte applicazioni come scopi di ricerca, analisi dei farmaci, analisi dei cibi, ecc. La LCMS è principalmente utilizzato per separare, rilevare, identificare e quantificare le proprietà biochimiche di un particolare campione in presenza di miscele chimiche complesse.
HPLC: HPLC è acronimo di cromatografia liquida ad alte prestazioni. È una tecnica di separazione che viene principalmente utilizzata per separare i componenti, per identificare e quantificare ciascun componente in una miscela.
LCMS: LCMS è sinonimo diCromatografia liquida e spettrometria di massa. È una tecnica analitica che combina le capacità di separazione fisica della cromatografia liquida con le capacità di analisi di massa della spettrometria di massa (MS).
HPLC: Questo è solo un metodo di cromatografia liquida.
LCMS: Questa è una combinazione di metodo di cromatografia liquida e metodo di spettrometria di massa.
HPLC: Rispetto a LCMS, l'analisi HPLC è meno efficiente e più lenta.
LCMS: Rispetto all'HPLC, l'analisi LCMS è efficiente e più veloce.
HPLC: Rispetto a LCMS, l'analisi HPLC è meno sensibile.
LCMS: Rispetto all'HPLC, l'analisi LCMS è più sensibile.
HPLC: Rispetto a LCMS, l'analisi HPLC è meno specifica.
LCMS: Rispetto all'HPLC, l'analisi LCMS è più specifica.
HPLC: HPLC fornisce risultati meno accurati rispetto a LCMS per la determinazione di alcuni prodotti chimici.
LCMS: LCMS fornisce risultati più precisi rispetto all'HPLC per la determinazione di alcuni prodotti chimici.
HPLC: HPLC può essere considerato come un componente di LCMS.
LCMS: LCMS non può essere considerato come un componente di HPLC.
HPLC: La sorgente di ionizzazione non esiste nello strumento HPLC.
LCMS: La sorgente ionica è presente nello strumento LCMS.
HPLC: Gli ioni, i polimeri, le molecole organiche e le biomolecole possono essere analizzati usando l'HPLC.
LCMS: Le molecole organiche e le biomolecole possono essere analizzate. A differenza di HPLC, LCMS può essere utilizzato per esaminare miscele non completamente risolte.
HPLC: Il diagramma di uno strumento HPLC è riportato nella figura 1 e in genere include un campionatore automatico, pompe e un rilevatore. Il campionatore introduce la miscela campione nella fase mobile (miscela pressurizzata di solventi come acqua, acetonitrile e / o metanolo) che la trasferisce alla colonna. Le pompe erogano il flusso e la composizione desiderati della fase mobile attraverso la colonna. La colonna è riempita con l'adsorbente, che è una particella solida granulare come silice o polimeri. Il rivelatore produce un segnale proporzionale alla quantità di presenza costituente del campione nella colonna, consentendo quindi un'analisi quantificabile dei costituenti del campione selezionati. Lo strumento HPLC è controllato e l'analisi dei dati è fornita da un microprocessore digitale e da un software utente.
Figura 1: Diagramma dello strumento HPLC
LCMS: Il diagramma dello strumento LCMS è riportato in figura 2. L'estratto del campione viene inserito nella colonna costituita da HPLC. Questa colonna trattiene i metaboliti del campione in base a caratteri fisici e i diversi metaboliti fluiscono verso lo spettrometro di massa a diversi intervalli di tempo. La spettroscopia di massa è utilizzata per valutare le masse di particelle, per determinare la disposizione elementare di una molecola e per chiarire le strutture molecolari. Tuttavia, il campione dovrebbe essere ionizzato per generare molecole caricate al fine di determinare i loro rapporti massa-carica. Pertanto, al posto degli strumenti HPLC, gli LCMS consistono in tre moduli aggiuntivi come la sorgente di ferro, un analizzatore di massa e un rilevatore. Una sorgente di ioni può trasformare il campione in fase gassosa in ioni e un analizzatore di massa che raggruppa gli ioni per le loro masse utilizzando campi elettromagnetici. Infine, un rilevatore quantifica i valori e fornisce i dati di ogni ione presente nel campione. La tecnica LCMS può essere utilizzata per applicazioni sia qualitative che quantitative.
Figura 2: Schema dello strumento LCMS
In conclusione, l'HPLC è un metodo di cromatografia liquida mentre LCMS è una combinazione di cromatografia liquida e spettrometria di massa. Entrambe queste tecniche di analisi hanno caratteristiche diverse, ma possono essere utilizzate per identificare e quantificare composizioni alimentari, prodotti farmaceutici e altre molecole bioattive.
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