Differenza tra CFU e MPN

Differenza chiave - CFU vs MPN
 

L'unità di formazione di colonie (CFU) e il numero più probabile (MPN) sono due metodi usati per enumerare i microrganismi nei campioni. Entrambi i parametri sono utilizzati per rilevare la qualità dell'acqua e batteri indicatori fecali in campioni di acqua. L'unità di formazione di colonie è una misura utilizzata per elencare il numero di cellule batteriche vitali o di cellule fungine in volume o peso specifici di un dato campione. L'unità standard per questo parametro è CFU / ml o CFU / g. Il numero più probabile è un'altra unità utilizzata per misurare il numero di cellule batteriche vitali in un campione liquido. La differenza chiave tra CFU e MPN è quella CFU è calcolata dalle colonie batteriche e fungine che crescono su una piastra di agar solido mentre L'MPN è calcolato da batteri vitali che crescono in un mezzo liquido.

CONTENUTO

1. Panoramica e differenza chiave
2. Cos'è il CFU 
3. Cos'è MPN
4. Confronto affiancato - CFU vs MPN in forma tabulare
5. Sommario

Cos'è il CFU?

Unità formante colonia (CFU) è un parametro che misura il numero di cellule batteriche o fungine in un dato campione. Il metodo che conta le unità di formazione di colonie viene indicato come numero di piastre standard. Le colonie vitali che appaiono sulle piastre di agar sono espresse in CFU per 1 ml (unità formante colonia per millilitro) del campione per liquidi o CFU per 1 g (unità formanti colonia per un grammo) del campione per i solidi.

Esistono due metodi comuni utilizzati per misurare CFU in un campione. Loro sono metodo di piastra di diffusione e versare il metodo della piastra. Questi due metodi sono supportati da una tecnica chiamata diluizione seriale. I campioni diluiti in serie consentono di ottenere un numero numerabile di colonie sulla superficie dell'agar. Un volume noto di campione può essere distribuito sulla superficie di una piastra di agar o miscelato con agar e versato su una piastra. La piastra viene quindi incubata e vengono contate le colonie in via di sviluppo. Il numero di colonie si riferisce al numero di microrganismi presenti nel campione originale. Le lastre che mostrano troppe colonie o troppo poche colonie sono escluse dal conteggio perché i risultati potrebbero non essere statisticamente accurati su quelle lastre. Statisticamente, l'intervallo migliore è di 30 - 300 colonie su una piastra di agar. Quindi, le piastre corrette dovrebbero essere selezionate per un'enumerazione accurata. La diluizione seriale viene eseguita per la funzione sopra descritta.

Una volta calcolato il numero di colonie vitali su piastre, CFU / ml può essere calcolato utilizzando la seguente equazione.

CFU per ml di campione originale = numero di colonie su un fattore di diluizione X della piastra

Fattore di diluizione = (1 / Diluizione della piastra)

Ad esempio, se ottieni 149 colonie sul piatto del 10^-4 diluizione, quindi il numero di batteri in 1 ml del campione originale può essere calcolato come segue:

CFU / ml = (149) x (1/10^-4)

= 149 × 10⁴ o 1490000

= 1. 49 x 10⁶

Figura 01: Unità di formazione di colonie

Cos'è MPN?

Il numero più probabile è una misura alternativa a CFU / ml. L'MPN stima anche le cellule vitali in un campione liquido. Conta organismi che crescono in una coltura liquida ed è una tecnica prevalentemente batteriologica. Questo metodo è particolarmente utile per campioni che contengono basse concentrazioni di cellule batteriche; ad esempio, latte, acqua potabile, ecc. Il valore MPN è espresso per 100 ml di volume. MPN si basa su un metodo statistico basato sulla teoria della probabilità. Esistono tabelle statistiche progettate per trovare valori MPN per 100 ml del campione. Queste tabelle mostrano i risultati con limiti di confidenza del 95%.

Il valore MPN viene calcolato dopo aver eseguito una tecnica denominata metodo di fermentazione a valvole multiple. Tre serie di provette contenenti un adatto terreno di coltura vengono inoculate con tre diversi volumi del campione come 10 ml, 1 ml e 0,1 ml e incubate per la crescita. Dopo il periodo di incubazione, le provette hanno un punteggio + (positivo) o - (negativo) per la presenza o l'assenza di crescita. Il modello di risultati positivi e negativi viene poi confrontato con una tabella MPN di probabilità statistiche per stimare il numero di microrganismi. Quindi viene indicato il valore MPN per 100 ml del campione. L'MPN è ampiamente utilizzato per rilevare i batteri coliformi presenti nei campioni di acqua.

Figura 02: tabella MPN

Qual è la differenza tra CFU e MPN?

CFU vs MPN
CFU è una misura utilizzata per esprimere il numero di colonie vitali batteriche o fungine in un dato campione.	L'MPN è una misura alternativa al CFU e misura il numero di cellule batteriche vitali in un campione liquido.
Unità
CFU / ml o CFU / g	MPN / 100 ml
Calcolo
CFU viene calcolato contando il numero di colonie coltivate su piastre di agar.	L'MPN viene calcolato confrontando i modelli positivi e negativi delle provette con la tabella statistica MPN.
Tecnica di diluizione seriale
La diluizione seriale viene eseguita prima di posizionare i campioni su piastre di agar.	La diluizione seriale normalmente non viene eseguita quando si calcola l'MPN
metodi
Metodo di piastra di spargimento e metodo di piastra di versamento sono due metodi per ottenere CFU.	La fermentazione a tubi multipli è il metodo che esegue per ottenere il valore MPN.

Riepilogo: CFU vs MPN

Misurare la crescita microbica è necessario per molte ragioni. Negli impianti di trasformazione alimentare, è necessario misurare il livello e il tipo di microrganismi negli alimenti. Nell'industria alimentare e in medicina, è necessario garantire che i trattamenti di sterilizzazione vengano applicati efficacemente. Negli impianti di trattamento delle acque reflue, è tenuto a prendere regolarmente il conteggio microbico. Quando si ottimizza la procedura in biologia molecolare, è necessario misurare il numero di colonie sulle piastre. Quindi, ci sono diversi metodi di enumerazione e di misurazione della crescita disponibili. CFU e MPN sono due metodi che adottano ampiamente in vari campi. CFU è una misura del numero di colonie batteriche e fungine vitali presenti in un dato campione. Viene calcolato utilizzando il metodo di conteggio delle piastre standard o il metodo di conta delle piastre praticabile. L'MPN è un'altra misura che esprime il numero di cellule batteriche presenti in un dato volume del campione liquido. Viene calcolato utilizzando il metodo di fermentazione a tubi multipli e la tabella MPN. Questa è la differenza tra CFU e MPN.

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Riferimenti:

"Unità di formazione di colonie". Wikipedia. Wikimedia Foundation, 28 maggio 2017. Web. Disponibile qui. 01 giugno 2017.
"Microbiologia - 014 - Numero più probabile." Microbiologia - 014 - Numero più probabile | Programma universitario di microbiologia. N., n. web. Disponibile qui. 01 giugno 2017.

Cortesia dell'immagine:

1. "Conteggio CFU manuale" di Quentin Geissmann - Opera propria (CC BY-SA 3.0) attraverso Commons Wikimedia
2. "OSC Microbio 00 EE MPNTable" di CNX OpenStax - (CC BY 4.0) attraverso Commons Wikimedia