Elettroforesi vs Elettroosmosi
Metodi di separazione fisica come filtraggio, distillazione, cromatografia su colonna non sono metodi semplici quando si arriva alla separazione di alcune molecole. L'elettroforesi e l'elettro-osmosi sono altre due tecniche di separazione che possono essere utilizzate per separare le particelle cariche.
Cos'è l'elettroforesi?
L'elettroforesi è una tecnica per separare le molecole in base alle loro dimensioni. Fondamentale per questa separazione è la carica della molecola e la sua capacità di muoversi in un campo elettrico. Questa è la tecnica più comune e principale nella biologia molecolare per separare le molecole, in particolare il DNA e le proteine. Questo è in gran parte in uso perché è relativamente facile e poco costoso. L'apparato per l'elettroforesi può essere un po 'complicato e la sua preparazione richiede del tempo. Ma possiamo facilmente realizzare un apparecchio per elettroforesi dalle cose che abbiamo in laboratorio. Le tecniche di elettroforesi possono variare in base ai nostri scopi. Possiamo usare l'elettroforesi monodimensionale per la separazione del DNA o delle proteine. L'elettroforesi bidimensionale viene utilizzata quando sono richiesti campioni più risolti (come nel caso della stampa digitale). Un gel è usato come mezzo di supporto per separare le molecole. Questo gel può essere preparato come fogli piatti o in tubi. La base di questa procedura è di separare le molecole in base alla loro velocità di movimento attraverso un gel quando viene fornito un campo elettrico. Le molecole caricate negativamente come il DNA tendono a spostarsi verso il polo positivo in questo campo elettrico mentre le molecole caricate positivamente tendono a spostarsi verso il polo negativo. Due tipi di gel sono utilizzati in elettroforesi come agarosio e poliacrilammide. Questi due hanno diversi poteri risolutivi. Il gel agisce come un setaccio per filtrare le diverse dimensioni di molecole. Le cariche elettrostatiche installate nel gel fungono da forza.
La separazione dipende dalla mobilità degli ioni.
F = fv = Zee
V = ZeE / f
F = forza che agisce su una particella
f = coefficiente d'attrito
V = velocità di migrazione media
Z = carica della particella migrante
e = costo elementare
E = forza del campo elettrico
Le condizioni necessarie per l'elettroforesi sono relativamente semplici. Quando si effettua il gel e si esegue il campione, viene utilizzato un buffer. Marcatori e coloranti sono usati per scopi di visualizzazione.
Cos'è l'Elettroosmosi?
Questo è il processo di spostamento di un liquido attraverso un materiale utilizzando un campo elettrico applicato. Il movimento può avvenire attraverso un materiale poroso, lungo una membrana capillare, ecc. Questo può essere usato come tecnica di separazione (in particolare l'elettro-osmosi capillare). La velocità del liquido è linearmente proporzionale al campo elettrico applicato. Dipende anche dal materiale utilizzato per costruire il canale e la soluzione utilizzata. Nell'interfaccia, la soluzione e il materiale hanno ottenuto cariche opposte e questo è noto come doppio strato elettrico. Quando viene applicato un campo elettrico alla soluzione, il doppio strato elettrico si sposta della forza Coulomb risultante. Questo è noto come il flusso elettro-osmotico.
Qual è la differenza tra elettroforesi ed elettro-osmosi? • Nell'elettroforesi, particelle solide (macromolecole come acidi nucleici o proteine) vengono mosse usando un campo elettrico. Ma nell'elettrosmosi un liquido si sta muovendo. • Nell'elettroforesi, il materiale solido di supporto è un gel. Ma l'elettro-osmosi può essere un gel, una membrana, un capillare, ecc. |