Il campo della ricerca ha preso una svolta importante con l'introduzione della coltura cellulare e l'uso di linee cellulari per la ricerca. Diversi test sono effettuati su cellule e linee cellulari artificialmente preparate per valutare il comportamento della cellula. La maggior parte della ricerca basata sull'uomo richiede la coltura cellulare e le linee cellulari per convalidare i risultati, specialmente quando gli studi di ricerca si basano sulla farmacologia e sulla scoperta di farmaci. La coltura cellulare primaria è una coltura preparata mediante isolamento diretto delle cellule tramite metodi meccanici o enzimatici. Una linea cellulare viene preparata passando continuamente una coltura cellulare primaria per ottenere una linea cellulare che ha acquisito caratteri omologhi. Il differenza fondamentale tra la coltura cellulare primaria e la linea cellulare è il numero di tempi di passaggio che ciascuno di essi possiede. La coltura cellulare primaria è direttamente isolata mentre una linea cellulare viene preparata passando per una coltura cellulare primaria per diverse volte.
1. Panoramica e differenza chiave
2. Cos'è una coltura cellulare primaria
3. Cos'è una linea cellulare
4. Somiglianze tra coltura cellulare primaria e linea cellulare
5. Confronto affiancato: coltura cellulare primaria vs linea cellulare in forma tabulare
6. Sommario
La coltura cellulare primaria è una preparazione di colture cellulari isolando le cellule direttamente dalla fonte mediante metodi meccanici o enzimatici. Le cellule vengono isolate mediante metodi di tripsinizzazione o non tripsinizzazione. Le colture cellulari primarie vengono coltivate in terreni di crescita adatti che contengono fattori di crescita, ormoni, lipidi e altri componenti indefiniti. Alcuni media devono essere accompagnati da siero. I media assicurano che le condizioni per la crescita siano ottimizzate e che le cellule sopravvivano in condizioni ottimali. Le cellule possono essere isolate da diverse fonti di tessuto come tessuto epatico, endotelio e tessuto neurale negli esseri umani o animali superiori tramite tripsinizzazione.
Quando si isolano le cellule da piante e microrganismi, vengono utilizzate procedure speciali di estrazione, che utilizzano metodi meccanici e chimici. Queste cellule isolate possono essere immobilizzate su un supporto solido o possono essere passate per diverse generazioni per essere sviluppate in una linea cellulare.
Le colture cellulari primarie sono principalmente di due tipi; Colture cellulari aderenti e colture cellulari in sospensione. Le colture cellulari primarie aderenti sono dipendenti dall'ancoraggio e richiedono un solido supporto per la crescita. Le colture cellulari primarie aderenti sono principalmente derivate da tessuti o organi. Le colture cellulari primarie di sospensione sono indipendenti dall'ancoraggio e crescono in mezzi liquidi. Le colture di sospensione dovrebbero essere continuamente agitate durante la fase di crescita. Le colture cellulari primarie di sospensione possono essere direttamente derivate dal sangue.
Le colture cellulari primarie hanno una durata di vita relativamente inferiore, ma le informazioni derivano da colture cellulari primarie sotto in vitro condizioni fornisce il fondamento di base per molti studi. Sono utili per studiare le caratteristiche della cellula, sia del comportamento morfologico che chimico.
Le linee cellulari sono ampiamente utilizzate nella ricerca e attualmente le linee cellulari come linee cellulari cancerose, linee cellulari epatiche e linee cellulari renali sono disponibili in commercio per scopi di ricerca. Le linee cellulari sono preparate mediante il passaggio continuo della coltura cellulare primaria. Il passaggio si riferisce al processo di subcoltura in cui le colture cellulari sono sviluppate in una linea cellulare. Queste linee cellulari sono colture in matrici bidimensionali o tridimensionali e mantenute come linee cellulari.
Le linee cellulari sono classificate come linee cellulari finite e continue. Linee cellulari finite sono sottoposti a un numero definito di passaggi (20 - 30 passaggi). Al completamento del numero richiesto di passaggi, la linea cellulare entra in uno stadio di senescenza. Queste cellule sono facili da gestire in quanto la loro crescita è definita. Il linee cellulari continue sono anche indicati come linee cellulari immortalizzate. Queste linee cellulari non hanno un numero definito di passaggi. Crescono indefinitamente e quindi sono in grado di acquisire mutazioni. Pertanto, le linee cellulari continue sono facilmente mutate e quindi, cambiano nelle loro caratteristiche morfologiche e genetiche, a differenza delle linee cellulari finite.
Figura 01: Linea cellulare
Le linee cellulari vengono utilizzate in quanto è più conveniente rispetto all'utilizzo di una coltura cellulare primaria in quanto può essere utilizzata più e più volte per un certo periodo. Ma è più soggetto a mutazioni e contaminazioni mentre aumenta la loro proliferazione.
Coltura cellulare primaria vs linea cellulare | |
Una coltura cellulare primaria è una coltura preparata mediante isolamento diretto delle cellule mediante metodi meccanici o enzimatici. | Una linea cellulare viene preparata passando continuamente una coltura cellulare primaria per ottenere una linea cellulare che ha acquisito caratteri omologhi. |
Numero di passaggi | |
Le colture cellulari primarie non sono passate, le cellule vengono mantenute in condizioni di coltura. | Le cellule vengono passate definitivamente o indefinitamente nel creare linee cellulari. |
tipi | |
La coltura di cellule primarie aderenti e la coltura di cellule primarie di sospensione sono due tipi di colture di cellule primarie. | La linea cellulare finita e la linea cellulare continua sono due tipi di linee cellulari. |
Durata | |
Le colture cellulari primarie hanno una vita breve. | Le linee cellulari hanno una vita più lunga. |
Le colture cellulari primarie e le linee cellulari sono ampiamente utilizzate nella ricerca per studiare i modelli comportamentali di diverse cellule in condizioni diverse e sotto diversi aspetti farmacologici. Le colture cellulari primarie sono direttamente isolate dall'organo o dal tessuto di origine e vengono coltivate su un terreno di coltura. Le condizioni sono ottimizzate per la crescita delle cellule specifiche. Le linee cellulari, al contrario, vengono preparate passando le colture cellulari primarie per un numero finito o infinito di volte. Le linee cellulari sono disponibili in commercio e sono popolari tra i ricercatori grazie alla facilità d'uso.
1.Lonza, Celle primarie contro linee cellulari. Disponibile qui
1. "Colonia di cellule cellulari umane clonata in vitro attraverso l'uso di anelli di clonazione" di Paphrag (CC BY-SA 2.5) attraverso Commons Wikimedia