Differenza tra citometria a flusso e FACS

Differenza chiave - Citometria a flusso vs FACS

Nel contesto della teoria cellulare, le cellule sono l'unità strutturale e funzionale di base di tutti gli organismi viventi. Lo smistamento cellulare è una metodologia che viene utilizzata per separare cellule diverse in base alle caratteristiche fisiologiche e morfologiche. Possono essere di caratteristiche intracellulari o extracellulari. L'interazione di DNA, RNA e proteine ​​sono considerate proprietà interattive intracellulari mentre la forma, le dimensioni e le diverse proteine ​​superficiali sono considerate proprietà extracellulari. Nella scienza moderna, le metodologie di selezione cellulare hanno portato ad assistere le diverse indagini negli studi biologici e anche nella definizione di nuovi principi attraverso la ricerca sulla medicina. Lo smistamento cellulare è condotto su varie metodologie che includono sia primitive con meno attrezzature e metodologie tecnologiche avanzate con l'uso di macchinari sofisticati. Citometria a flusso, selezione cellulare fluorescente attivata (FACS), selezione di celle magnetiche e ordinamento di singole cellule sono le principali metodologie utilizzate. Citometria a flusso e FACS sono sviluppati per differenziare le cellule in base alle loro proprietà ottiche. FACS è un tipo specializzato di citometria a flusso. La citometria a flusso è una metodologia che viene utilizzata durante l'analisi di una popolazione eterogenea di cellule secondo diverse molecole di superficie cellulare, dimensioni e volume che consente l'analisi di singole cellule. FACS è un processo mediante il quale una miscela campione di cellule viene ordinata in base alle loro caratteristiche di diffusione della luce e fluorescenza in due o più contenitori. Questo è il differenza fondamentale tra citometria a flusso e FACS.

CONTENUTO

1. Panoramica e differenza chiave
2. Cos'è la citometria a flusso
3. Cos'è FACS
4. Somiglianze tra la citometria a flusso e il FACS
5. Confronto affiancato - Citometria a flusso vs FACS in forma tabulare
6. Sommario

Cos'è la citometria a flusso?

La citometria a flusso è un metodo che viene utilizzato per esaminare e determinare l'espressione di molecole intracellulari e la superficie cellulare e per definire e caratterizzare tipi cellulari distinti. Viene anche utilizzato per determinare il volume e le dimensioni delle cellule e per valutare la purezza delle sottopopolazioni isolate. Ciò consente la valutazione multiparametrica di singole celle all'incirca nello stesso tempo. La citometria a flusso viene utilizzata per misurare l'intensità della fluorescenza prodotta a causa di anticorpi marcati con fluorescenza che aiutano a identificare proteine ​​o ligandi che si legano alle cellule associate.

Figura 01: Citometria a flusso

Generalmente, la citometria a flusso include principalmente tre sottosistemi. Sono la fluidica, l'elettronica e l'ottica. Nella citometria a flusso sono disponibili cinque componenti principali utilizzati nello smistamento cellulare. Si tratta di una cella di flusso (un flusso di liquido che viene utilizzato per trasportarli e allineare le celle per il processo di rilevamento ottico), un sistema di misurazione (può essere di diversi sistemi tra cui lampade al mercurio e allo xeno, acqua raffreddata ad alta potenza o laser a bassa potenza con raffreddamento ad aria o laser a diodi), un ADC; Sistema di conversione da analogico a digitale, sistema di amplificazione e computer per analisi. L'acquisizione è il processo mediante il quale i dati vengono raccolti dai campioni utilizzando il citometro a flusso. Questo processo è mediato da un computer collegato al citometro a flusso. Il software presente nel computer analizza le informazioni fornite al computer dal citometro a flusso. Il software ha anche la capacità di regolare i parametri dell'esperimento controllando il citometro a flusso.

Cos'è FACS?

Nel contesto della citometria a flusso, Selezione cellulare attivata dalla fluorescenza (FACS) è un metodo che viene utilizzato per differenziare e classificare un campione di una miscela di cellule biologiche. Le celle sono separate da due o più contenitori. Il metodo di smistamento si basa sulle caratteristiche fisiche della cellula che include la diffusione della luce e le caratteristiche di fluorescenza della cellula. Questa è una tecnica scientifica importante, che può essere utilizzata per ottenere risultati quantitativi e qualitativi affidabili di segnali di fluorescenza emessi da ciascuna cella. Durante FACS, inizialmente, la miscela pre-ottenuta di cellule; una sospensione è diretta al centro di una stretta corrente di liquido che scorre rapidamente. Il flusso di liquido è progettato per separare le cellule nella sospensione in base al diametro di ciascuna cella. Un meccanismo di vibrazione viene applicato al flusso di sospensione che si traduce nella formazione di singole goccioline.

Figura 02: FACS

Il sistema è calibrato per creare una singola goccia con una cella. Poco prima della formazione di goccioline, la sospensione di flusso si muove lungo un apparato di misurazione della fluorescenza che rileva la caratteristica di fluorescenza di ciascuna cella. Nel punto di formazione delle goccioline, viene posizionato un anello di carica elettrica che viene indotto dall'animale ad una carica prima della misurazione dell'intensità della fluorescenza. Una volta che le goccioline sono formate dal flusso di sospensione, una carica viene intrappolata all'interno delle goccioline che quindi entra in un sistema di deflessione elettrostatica. Secondo la carica, il sistema devia le goccioline in diversi contenitori. Il metodo di applicazione della carica varia in base ai diversi sistemi utilizzati in FACS. L'attrezzatura utilizzata in FACS è nota come sorter a cella attivata a fluorescenza.

Qual è la somiglianza tra la citometria a flusso e il FACS?

• Citometria a flusso e FACS sono sviluppati per differenziare le cellule in base alle loro proprietà ottiche.

Qual è la differenza tra la citometria a flusso e il FACS?

Flow Cytometry vs FACS
La citometria a flusso è una metodologia che viene utilizzata durante l'analisi di una popolazione eterogenea di cellule secondo diverse molecole di superficie cellulare, dimensioni e volume che consente l'analisi di singole cellule.	FACS è un processo mediante il quale una miscela campione di cellule viene ordinata in base alle loro caratteristiche di diffusione della luce e fluorescenza in due o più contenitori.

Riepilogo: flusso Cytometry vs FACS

La cellula è l'unità strutturale e funzionale di base di tutti gli organismi viventi. L'ordinamento cellulare è il processo mediante il quale le cellule sono isolate e differenziate in diverse categorie in base alle loro proprietà intracellulari ed extracellulari. Citometria a flusso e FACS sono due metodologie importanti nell'ordinamento cellulare. Entrambi i processi sono sviluppati per differenziare le cellule in base alle loro proprietà ottiche. La citometria a flusso è una metodologia che viene utilizzata durante l'analisi di una popolazione eterogenea di cellule in base a diverse molecole di superficie cellulare, dimensioni e volume che consente l'analisi di singole cellule. FACS è un processo mediante il quale una miscela campione di cellule viene ordinata in base alle loro caratteristiche di diffusione della luce e fluorescenza in due o più contenitori. Questa è la differenza tra Flow Cytometry e FACS.

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Riferimento:

1. Flow Cytometry (FCM) / FACS | Ordinamento cellulare a fluorescenza (FACS). Accesso 22 settembre 2017. Disponibile qui
2. Ibrahim, Sherrif F. e Ger van den Engh. "Flow Cytometry and Cell Sorting." SpringerLink, Springer, Berlin, Heidelberg, 1 gen. 1970 ... 22 settembre 2017. Disponibile qui

Cortesia dell'immagine:

1. "Cytometer" By Kierano - Opera propria, (CC BY 3.0) attraverso Commons Wikimedia
2. 'Ordinamento di cellule con assistenza alla fluorescenza (FACS) B'By SariSabban - Sabban, Sari (2011) Sviluppo di un sistema modello in vitro per studiare l'interazione di Equus di equus caballus con il suo recettore FcεRI ad alta affinità (tesi di dottorato), The University of Sheffield,(CC BY-SA 3.0) attraverso Commons Wikimedia