La coltura di cellule animali viene eseguita per mantenere le linee cellulari degli animali al fine di condurre molte attività di ricerca. Le linee cellulari degli animali vengono mantenute in condizioni sterili e richiedono tecniche speciali. Sono utilizzati negli studi riguardanti la produzione di vaccini, per identificare il comportamento della cellula nei confronti di agenti cancerogeni e mutageni e nella ricerca sul cancro. I terreni di coltura cellulare sono molto importanti per il successo della coltura di cellule animali. Esistono diversi tipi di media di coltura cellulare come Medium Eagle modificato di Dulbecco (DMEM) e Eagle's Minimum Essential Medium (EMEM). DMEM è un terreno basale modificato con aumentate concentrazioni di amminoacidi e vitamine fino a quattro volte. Ciò include anche alcune sostituzioni che aumentano le condizioni nutrizionali dei media. EMEM è uno dei primi tipi di terreni di coltura di cellule animali sviluppati da Harry Eagle. È un semplice mezzo basale con le quantità minime di composizioni nutritive. Il differenza fondamentale tra due media è la composizione nutriente. EMEM è composto dalle concentrazioni minime di nutrienti necessari per la crescita della coltura, mentre il DMEM è un mezzo molto complesso con aumentate concentrazioni di aminoacidi e vitamine.
1. Panoramica e differenza chiave
2. Cos'è DMEM
3. Cos'è EMEM
4. Somiglianze tra DMEM ed EMEM
5. Confronto affiancato - DMEM vs EMEM in forma tabulare
6. Sommario
Modified Eagle's Medium (DMEM) di Dulbecco è un tipo di supporto modificato che è commercialmente preparato come polvere bianca cremosa. Questo è adattato da EMEM, e la composizione dei nutrienti viene modificata aumentando la concentrazione di aminoacidi e vitamine. La concentrazione di aminoacidi è aumentata fino a due volte rispetto al terreno basale. La concentrazione di vitamine aumenta fino a quattro volte aumentando così il contenuto di nutrienti nel terreno.
DMEM è anche modificato aggiungendo più sali come il nitrato ferrico, il piruvato di sodio e alcuni amminoacidi non essenziali come la serina e la glicina. Anche la concentrazione di glucosio nei media è alterata. La formulazione originale è composta da 1000 mg / L di glucosio, mentre nel DMEM la concentrazione è aumentata fino a 4500 mg / L. DMEM richiede anche l'integrazione di un mezzo di siero in quanto non è un mezzo completo. Più spesso, DMEM è integrato con Fetal Bovine Serum (FBS). FBS fornisce le proteine e i fattori di crescita richiesti per il processo di coltura.
Il pH del mezzo varia dopo l'aggiunta di bicarbonato di sodio. Il pH del terreno prima dell'aggiunta di bicarbonato di sodio è intorno a 6,80 - 7,40, mentre il pH, dopo l'aggiunta di bicarbonato di sodio, è compreso tra 7,60 e 8,20. La temperatura di conservazione del supporto è 2 - 8 0C.
Figura 01: DMEM
Il medium minimo essenziale di Eagle (EMEM) è uno dei primi media sviluppati nella coltura cellulare di linee di cellule animali. I primi tipi di linee di cellule animali coltivate usando EMEM includono le cellule L del mouse e le cellule HeLa. Il supporto EMEM è anche un tipo di supporto modificato. Harry Eagle ha prima formulato il mezzo EMEM. I mezzi di comunicazione EMEM includevano gli amminoacidi e le vitamine essenziali in una concentrazione minima richiesta dai tipi di cellule. Gli amminoacidi non essenziali non sono stati inclusi nella formulazione e le concentrazioni di glucosio e bicarbonato di sodio sono ridotte. Sebbene i media contenessero la quantità equilibrata di requisiti minimi di crescita per il successo della crescita delle cellule.
EMEM non è un mezzo completo. Pertanto, per il successo della crescita delle cellule dei mammiferi è necessaria un'integrazione con il siero. EMEM è utilizzato su un'ampia varietà di cellule ed è ancora un mezzo di comunicazione popolare tra i ricercatori di colture cellulari.
DMEM vs EMEM | |
DMEM è un tipo di terreno basale modificato, con aumento delle concentrazioni di aminoacidi e vitamine. Ciò include anche alcune sostituzioni che aumentano le condizioni nutrizionali dei media. | EMEM è uno dei primi tipi di terreni di coltura di cellule animali sviluppati da Harry Eagle. È un semplice mezzo basale con le quantità minime di composizioni nutritive. |
Modifiche di amminoacido | |
La concentrazione di amminoacidi è aumentata fino a due volte nel mezzo DMEM. | La concentrazione minima di amminoacido è utilizzata in EMEM. |
Modifiche di vitamine | |
La concentrazione di vitamina è aumentata fino a quattro volte in DMEM. | La concentrazione minima di vitamine è utilizzata in EMEM. |
Concentrazione di glucosio | |
La concentrazione di glucosio è aumentata fino a 4500 mg / L in DMEM. | La concentrazione di glucosio è 1000 mg / L in EMEM. |
Presenza di amminoacidi non essenziali | |
Presente in DMEM. | Assente in EMEM. |
Presenza di componenti aggiuntivi | |
Componenti come il nitrato ferrico, il piruvato di sodio sono presenti in DMEM. | EMEM contiene la quantità minima di nutrienti. |
DMEM ed EMEM sono due media popolari di coltura di cellule animali che differiscono principalmente nelle loro composizioni nutritive. DMEM è una forma modificata di EMEM, dove le concentrazioni di nutrienti sono aumentate insieme all'aggiunta di alcuni nuovi componenti. EMEM è un supporto minimo e contiene tutti i fattori essenziali necessari per il successo della crescita delle linee di cellule animali. Questi terreni dovrebbero essere usati in condizioni di alta sterilità, ed entrambi i terreni dovrebbero essere integrati con il siero prima dell'uso. Questa è la differenza tra DMEM ed EMEM.
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1.Arora, Meenakshi. "Materiali di coltura cellulare: una revisione." Materiali e metodi, 25 novembre 2017. Disponibile qui
2. "Mezzo essenziale minimo di Eagle." Wikipedia, Wikimedia Foundation, 24 dic. 2017. Disponibile qui
1. 'Lifetech-DMEM'By Phaeton68 - Opera propria, (CC BY-SA 3.0) attraverso Commons Wikimedia