Trasformazione vs Trasfezione
Trasformazione e trasfezione sono due semplici tecniche utilizzate per introdurre un gene estraneo in una cellula ospite. Tuttavia, queste tecniche dipendono dal tipo di sistemi host o vettoriali.
Cos'è la trasformazione cellulare?
La trasformazione è la tecnica impiegata per introdurre i geni nei lieviti e nelle cellule batteriche. Questa tecnica di solito causa cambiamenti ereditabili nei geni, e quindi l'espressione del gene è permanente. La trasformazione batterica fu introdotta per la prima volta nel 1928 da Frederick Griffith. Poi, all'inizio degli anni '70, questa tecnica fu usata in E. coli. Durante il processo di trasformazione di E. coli, le cellule sono immerse in una soluzione ghiacciata di CaCl2. Questo passaggio rende E.coli cellule competenti. Successivamente, le cellule competenti vengono mescolate con il DNA plasmidico e vengono incubate su ghiaccio per 20-30 minuti. Quindi viene dato un breve shock termico per consentire il trasferimento del DNA nella cellula. Infine, le cellule vengono poste in un brodo nutriente e incubate a 37 ° C per 60-90 minuti al fine di stabilire i plasmidi. Una volta completati con successo questi passaggi, le celle trasformate possono essere posizionate su un supporto adatto per la propagazione delle celle. Poiché la trasformazione è considerata una tecnica inefficiente, non può essere utilizzata per la preparazione di banche clone.
Cos'è la trasfezione cellulare?
La trasfezione è un metodo di introduzione di un gene estraneo, di solito, in cellule di mammifero. Esistono due metodi di trasfezione; vale a dire, transfezione transitoria e trasfezione stabile. Nella transfezione transitoria, l'espressione genica è disponibile per un tempo limitato; quindi, l'alterazione del gene causa l'espressione temporanea. Questo metodo di trasfezione è semplice e veloce; quindi può essere usato regolarmente. Uno svantaggio della transfezione transiente è la difficoltà di applicare per i sistemi di sintesi proteica su larga scala.
Durante la transfezione stabile, un gene bersaglio è integrato nel genoma della cellula ospite, e quindi l'espressione genica è permanente, a differenza della transfezione transitoria.
Qual è la differenza tra Trasformazione e Trasfezione?
• La trasformazione è l'introduzione di un gene in una cellula procariota (batterica e di lievito), mentre la transfezione è solitamente chiamata introduzione di un gene in una cellula di mammifero.
• La trasformazione ha come risultato un'alterazione ereditabile, nei geni, mentre la trasfezione può determinare un'espressione temporanea o cambiamenti permanenti nei geni.